Все дипломы > Медицина > Добавить в закладки
Коллеги автора


Оставь голос:
Вы следите за научными мировыми открытиями?
Изредка о чем-то узнаю
Внимательно слежу
Нет - мне не интересно


Процитируем:
...« Приведена терминология, используемая в биосенсорном анализе. Дано краткое определение типам преобразователей, составляющих основу биосенсоров. Представлены характеристики био»...
подробнее

Медицина


Часто просматривают следующие страницы:


Френсис Бекон:

"Невежды презирают науку, необразованные люди восхишаются ею, тогда как мудрецы пользуются ею"



Рис. 4.1.26. Зависимость ответов сенсора от концентрации 2,4-D при различном содержании конъюгатов (комплексов 2,4-D-ПХ) в пробе.

Измерение приготовленных образцов, содержащих 2,4-D, показало, что присутствие 2,4-D в анализируемой пробе приводит к уменьшению величины сигнала сенсора, что являлось результатом конкуренции меченых молекул 2,4-D с молекулами, содержащимися в образце (рис. 4.1.26). Диапазон определяемых концентраций 2,4-D и минимально детектируемые концентрации зависели от концентраций конъюгатов (рис. 4.1.26). Нижний предел детекции 2,4-D был равен 1.0 и 2.0 нг/мл для концентраций конъюгата 0.6, 1.0 нг/мл, соответственно. Данная чувствительность является высокой и во многих случаях удовлетворяет требованиям чувствительности, предъявляемым к методам экологического мониторинга.

Детекция иммуноглобулина G человека. Содержание иммуноглобулина G (IgG) в плазме крови человека является важным показателем процессов общего метаболизма белков в организме, в связи с чем проведение клинических экспресс-анализов по определению его концентрации представляет актуальную задачу здравоохранения. Оценку содержания IgG в плазме выполняют иммунными методами. Применение биосенсорного подхода имеет практическую ценность в решении вопроса об экспресс-оценке содержания IgG. Рассмотрим кратко одну из разработанных схем иммуноанализа IgG сенсором на основе ПТ и сменной мембраны.

В сенсоре использована сэндвич-схема ИФА (рис.4.1.24.Б). На затворной области транзистора размещают мембрану, содержащую иммобилизованные антитела. Мембрана является сменным элементом и после выполнения анализа заменяется новой. В качестве ферментной метки используется ПХ. ПТ, содержащий мембрану с иммобилизованными АТ, погружают в раствор IgG, после чего, для завершения формирования сэндвича, погружают в раствор конъюгатов Ат к IgG, меченных ПХ. После удаления остатков непрореагировавших компонент производят оценку концентрации IgG. Для этого в измерительную кювету, содержащую ПТ, вводят субстратную смесь "ортофенилендиамин - аскорбиновая кислота", приводящую к выраженному изменению рН. Калибровочная кривая сенсора приведена на рис. 4.1.27. Минимальная детектируемая концентрация IgG составляла 10-11 М при высоком отношении полезного сигнала к фоновому. Линейный участок зависимости находился в диапазоне от 10-10 до 10-8 М, т.е. созданная модель сенсора имела высокую чувствительность и позволяла определять IgG в концентрациях, значительно меньших содержания этого белка в крови человека (диапазон концентраций IgG в плазме крови составляет 5´10-7 - 5´10-6 М).

Рис. 4.1.27. Калибровочная кривая для определения IgG в модельных образцах.

Созданную модель можно рассматривать как базовую. В данном примере представлена детекция иммуноглобулина G, вместе с тем, в зависимости от примененного типа антител, модель может быть использована для детекции других белковых антигенов. Важным преимуществом метода является простота измерений, которые можно проводить децентрализованно, вдали от крупных лабораторий, т.е. выполнять так называемую диагностику "на месте".

Определение концентрации бактериальных клеток Clostridium thermocellum. Обнаружение микроорганизмов различных видов в пробах является актуальной задачей для многих биотехнологических процессов, при оценке качества питьевой воды, для задач экологического контроля, системы здравоохранения. Известны различные методы обнаружения микроорганизмов. Высокочувствительными являются подходы, основанные на иммунологических тестах. Для разработки иммуносенсоров широко применяют ПТ. Поскольку общая идеология иммунодетекции микроорганизмов близка к описанным выше подходам детекции как низкомолекулярных соединений, так и белков, отметим лишь ее основные особенности. Так, одной из распространенных схем анализа микроорганизмов является приведенная на рис. 4.1.24.А. Процедура анализа выглядит следующим образом. Пробу, в которой содержатся микроорганизмы, прокачивают через мембрану, поры которой достаточно малы, чтобы удержать клетки. Задержанные мембраной микроорганизмы приводят в контакт с меченными антителами. В качестве метки достаточно часто применяют ПХ. Мембрану закрепляют на поверхности ПТ и в присутствии субстратной смеси определяют ее активность. Большему количеству микроорганизмов будет соответствовать большее количество фермента и более высокие значения аналитических сигналов.

Калибровочные зависимости для двух типов бактерий представлены на рис. 4.1.28. Зависимость (1) получена при иммунодетекции бактерий Clostridium thermocellum с использованием специфичных к данному виду клеток антител. Селективность анализа оценивали, используя в качестве контроля клетки Mycobacterium thermoautotrophicum, к оторым антитела не были специфичны и не должны были связываться с ними. Из рисунка видно, что сигналы для этих клеток значительно ниже, чем для C. thermocellum . Зависимость сигналов от концентрации клеток M. thermoautotrophicum, представлена кривой (2) на рис. 4.1.28. Сигналы, обусловленные присутствием M. thermoautotrophicum в пробе в диапазоне концентраций 107-108 кл/мл, не превышали 20% величины полезных сигналов, соответствующих C. Thermocellum, что отражает высокую селективность иммуноанализа.

Рис. 4.1.28. Иммунодетекция бактериальных клеток при предварительной сорбции клеток на активированную поверхность полимерной мембраны с последующим формированием комплекса "бактерии-Ат- -ПХ". 1 и 2 – калибровочные зависимости для клеток C. thermocellum и M. thermoautotrophicum, соответственно.

На правах рекламы
. Лагес, пренатальный биохимический скрининг пренатальный биохимический скрининг. |

Главы - параграфы


Так говорят:
Биосенсорный метод анализа химических соединений в...
Автор: Иришка
Я и в школе химию особенно не понимала, и теперь-т...
Автор: коля
Только что дочитал последнюю главу. Вообще замечат...
Автор: паша
Данное учебное пособие содержит так много хорошего...
Автор: ромка
Ну что я могу сказать? :) От одного только выражен...
Автор: ираида


Наука России - Наше будущее!