Все дипломы > Медицина > Добавить в закладки
Коллеги автора


Оставь голос:
Вы следите за научными мировыми открытиями?
Изредка о чем-то узнаю
Внимательно слежу
Нет - мне не интересно


Процитируем:
...« Приведена терминология, используемая в биосенсорном анализе. Дано краткое определение типам преобразователей, составляющих основу биосенсоров. Представлены характеристики био»...
подробнее

Медицина


Часто просматривают следующие страницы:


Френсис Бекон:

"Невежды презирают науку, необразованные люди восхишаются ею, тогда как мудрецы пользуются ею"



Приведенная на рис. 4.1.24.А схема иммуноферментного анализа на основе ПТ является одной из множества возможных. Так, например, кроме рассмотренной, широко распространена ее модификация, при которой на мембране исходно иммобилизуют антитела (рис. 4.1.24.А), с которыми затем связываются анализируемые антигены. С антигенами вновь связываются меченные антитела и выполняется оценка содержания ферментной метки, свидетельствующей об исходной концентрации антигена. Поскольку конечной стадией рассматриваемого анализа является выявление активности ферментной метки (в рассмотрении – пероксидазы хрена), конкретный вид примененной схемы не играет принципиальной роли.

Для ПХ существует широкий спектр восстановительных агентов, окисление которых сопровождается изменением рН раствора. Вопрос заключается в подборе субстратов и условий реакций, при которых изменение рН будет достаточно быстрым и пропорциональным концентрации ПХ. В результате исследований была получена оценка эффективности ряда субстратов, относящихся к группе анилинов и фенолов. В Таблице 4.1.5 представлены данные по начальной скорости изменения рН в результате пероксидазной реакции, протекающей в гомогенных условиях, которые показывают, что для таких субстратов как резорцин, пирокатехол начальные скорости окисления находятся в области средних значений этого параметра; применение комбинации p-иодофенол - люминол приводят к существенному росту начальной скорости реакции. Композиция o-фенилендиамин (ОФД) и аскорбиновая кислота (АК) позволили на порядок увеличить скорость по сравнению с комбинацией p-иодофенол – люминол, что явилось основанием для ее преимущественного использования в иммунодетекции на основе ПТ.

Таблица 4.1.5. Начальная скорость изменения рН в реакциях пероксидазного окисления восстановительных субстратов.

Вид ответов ПТ, возникающих при окислении некоторых из субстратов, указанных в Таблице 4.1.5, представлен на рис. 4.1.25. Окисление субстратов фенольного ряда сопровождается закислением среды, тогда как окисление анилинов приводит к смещению рН в щелочную область.

Рис. 4.1.25. Типичные отклики рН-чувствительного ПТ для различных пероксидазных субстратов (ПХ, 10-9 М). 1-ОФД+АК, 2-ОФД, 3-p-иодфенол+люминол, 4-пирокатехол.

Рассмотрим некоторые примеры анализа, выполняемого иммуносенсорами на основе ПТ с использованием ПХ в качестве ферментной метки.

Детекция 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты (2,4-D). Загрязнение окружающей среды пестицидами представляет общую проблему для стран с интенсивным сельскохозяйственным производством. Один из путей решения проблемы состоит в рациональном/сбалансированном использовании этих соединений, что возможно при наличии адекватных методов анализа их содержания в образцах почвы, воды, сельскохозяйственной продукции.

Биосенсоры, основанные на электрохимическом принципе детекции иммуноферментной метки, в частности, на рН-чувствительных полевых транзисторах, относятся к группе аналитических устройств, которые, сохранив приемлемую для практических задач чувствительность, оказываются недорогими приборами, позволяющими выполнять иммунодетекцию пестицидов. Разработка иммунобиосенсоров на основе полевых транзисторов позволяет подойти к созданию компактных биосенсорных анализаторов, потенциально полезных не только для использования в центральных лабораториях, но также и для индивидуального децентрализованного применения.

Для детекции 2,4-D разработана модель иммунобиосенсора на основе ПТ, анализ которой познавателен по ряду причин. Так, модель является унифицированной в том смысле, что может быть использована для детекции не только пестицидов (низкомолекулярных антигенов), но и белковых молекул (высокомолекулярных антигенов), а также клеток микроорганизмов. Принципиальными элементами, характеризующими модель, являются: использование пероксидазы хрена в качестве ферментной метки, генерирующей изменение рН; применение субстратной смеси "ортофенилендиамин - аскорбиновая кислота", которая, как было показано выше, оказывается наиболее эффективной в генерации изменений рН; использование техники сменных мембран для формирования биорецепторной части.

В рассматриваемом примере детекция 2,4-D построена на конкурентном методе ИФА. Это означает, что мембрана, расположенная на затворной области ПТ, содержит антитела к 2,4-D, а схема анализа предполагает конкуренцию за связывание с антителами молекул 2,4-D, находящихся в анализируемом образце и молекул 2,4-D, меченных пероксидазой хрена (конъюгатов), которые добавлялись к анализируемой пробе. Увеличение концентрации 2,4-D в образце приводило к снижению степени связывания метки с поверхностью мембраны и уменьшению сигнала сенсора. Указанная схема позволяет наиболее эффективно оценить содержание 2,4-D при концентрациях 2,4-D в образце и концентрации конъюгатов "2,4-D-ПХ" одного порядка.


Главы - параграфы


Так говорят:
Данное учебное пособие содержит так много хорошего...
Автор: ромка
Только что дочитал последнюю главу. Вообще замечат...
Автор: паша
Биосенсорный метод анализа химических соединений в...
Автор: Иришка
Я и в школе химию особенно не понимала, и теперь-т...
Автор: коля
Ну что я могу сказать? :) От одного только выражен...
Автор: ираида


Наука России - Наше будущее!