Все дипломы > Медицина > Добавить в закладки
Коллеги автора


Оставь голос:
Вы следите за научными мировыми открытиями?
Изредка о чем-то узнаю
Внимательно слежу
Нет - мне не интересно


Процитируем:
...« Приведена терминология, используемая в биосенсорном анализе. Дано краткое определение типам преобразователей, составляющих основу биосенсоров. Представлены характеристики био»...
подробнее

Медицина


Часто просматривают следующие страницы:


Френсис Бекон:

"Невежды презирают науку, необразованные люди восхишаются ею, тогда как мудрецы пользуются ею"



Взаимодействие антител с антигенами характеризуется высокой степенью сродства (аффинности). В силу этого для всех типов иммунного анализа наряду с высокой селективностью типична высокая чувствительность детекции. Разработка иммунобиосенсоров представляет перспективное направление исследований, т.к. иммунобиосенсоры сохраняют все основные параметры иммуноанализа и в дополнение к этому позволяют производить детекцию простыми методами вдали от специализированных центральных диагностических лабораторий. Для создания иммуносенсоров широко применяются рН-чувствительные полевые транзисторы. В средине 90-х годов существовало представление, что имуносенсор на основе ПТ должен иметь структуру, подобную представленной на рис. 4.1.23 – на поверхности затворного диэлектрика расположена мембрана, содержащая иммобилизованные антитела (Ат). Взаимодействие Ат с Аг (антигенами) приводит к изменению поверхностного заряда (потенциала) диэлектрика, что может явиться основой для изменения тока ПТ. Однако по ряду причин (прежде всего экранировка зарядов Ат и Аг ионами электролита измерительного раствора) данный подход не оказался эффективным и на основе ПТ были разработаны другие схемы; один из широко распространенных вариантов иммунобиосенсора, основанного на применении метода иммуноферментного анализа рассматривается далее.

Рис. 4.1.23. Схема иммуноПТ. Символами Aт обозначены антитела, иммобилизованные на границе раздела раствор - мембрана.

Несмотря на достаточно длительный период использования ПТ как основы для иммуноферментных сеносров, к настоящему времени не появилась установившаяся методика, которую можно было бы считать оптимальной. Постоянно появляются новые элементы метода, заслуживающие внимания в силу того, что содержат определенные улучшения по параметрам регистрации. Рассмотрим наиболее типичные особенности последних разработок. Так, к новым элементам иммунодетекции, реализованным в биосенсорах на основе ПТ и описанным в последнее время, относится:

применение в качестве ферментной метки пероксидазы хрена (ПХ);

для эффективного использования ПХ найдена оптимальная субстратная смесь, обеспечивающая высокие значения сигналов сенсора, т.е. изменения рН в биорецепторе;

для формирования биосенсоров используют сменные биорецепторные элементы.

Оценка эффективности субстратов пероксидазы хрена для рН-детекции. Активирующее влияние аскорбиновой кислоты.

Пероксидаза хрена широко используется в качестве ферментной метки в практике иммуноферментного анализа (ИФА). Среди методов регистрации пероксидазной активности следует назвать фотометрические, хемилюминесцентные и электрохимические. Последние отличаются простотой, возможностью автоматизации. Перспективным считалось и считается использование рН-чувствительных ПТ для создания иммуносенсоров, вместе с тем до недавнего времени схемы анализа, использующие ПХ, еще не были разработаны в досточной степени подробности. Варианты эффективного анализа появились сравнительно недавно в результате исследований, в которых были найдены композиции, позволяющие получать значительные сдвиги рН при окислении субстратов пероксидазы хрена. Рассмотрим этот вопрос более детально.

Схему биосенсорного иммуноанализа можно представить следующим образом (рис. 4.1.24). На транзисторе, в зоне затвора, располагается мембрана, на которой формируют комплексы "антигены – антитела – ферментная метка (ПХ)". Анализируемым объектом является антиген. Его предварительно фиксируют на мембране и условия фиксации выбирают таким образом, что чем выше его концентрация в образце, тем больше его количество на мембране. Затем мембрану погружают в раствор меченных ферментом (ПХ) антител, в результате чего формируется комплекс "антиген – антитело - ПХ". При таких условиях соблюдается соотношение - чем выше концентрация антигенов в пробе, тем выше поверхностная концентрация ПХ. Если указанный комплекс находится в среде, содержащей субстрат ПХ, происходит биохимическая реакция окисления субстрата. О количестве ПХ и, таким образом, о количестве антигенов, можно судить по интенсивности биохимической реакции. Для регистрации с помощью ПТ важно, чтобы данная реакция сопровождалась изменением рН.

Рис. 4.1.24. Схема анализа и измерения каталитической активности ферментной метки с помощью ПТ. А. Детекция микроорганизмов. Стадия 1- иммобилизация антигенов на мембране, стадия 2 - взаимодействие антител с антигенами (антитела мечены ПХ) – формирование комплекса "антигены – антитела – ферментная метка (ПХ)", стадия 3- измерение активности метки (ПХ). Б. Сэндвич-схема ИФА. Детекция иммуноглобулина G.

На правах рекламы
. Иглоукалывание при ожирении, лечение головной боли каталог. |

Главы - параграфы


Так говорят:
Ну что я могу сказать? :) От одного только выражен...
Автор: ираида
Я и в школе химию особенно не понимала, и теперь-т...
Автор: коля
Данное учебное пособие содержит так много хорошего...
Автор: ромка
Только что дочитал последнюю главу. Вообще замечат...
Автор: паша
Биосенсорный метод анализа химических соединений в...
Автор: Иришка


Наука России - Наше будущее!